Question

【題目】某目的基因兩側(cè)的DNA序列所含的限制性核酸內(nèi)切酶位點(diǎn)如圖所示，最好應(yīng)選用下列哪種質(zhì)粒作為載體（ ）

A. B.

C. D.

Answer 1

【答案】D

【解析】

試題A項(xiàng)中質(zhì)粒上只有一個(gè)限制酶NheⅠ切點(diǎn)，而目的基因的一端有NheⅠ切點(diǎn)，不能把目的基因切下來(lái)，故A不合題意；B項(xiàng)中質(zhì)粒上有一個(gè)AluⅠ切點(diǎn)，目的基因兩側(cè)也有切點(diǎn)，但是在DNA連接酶的作用下，目的基因不插入時(shí)質(zhì)粒自己也可以連接起來(lái)，故這種質(zhì)粒不是最佳；C項(xiàng)中的質(zhì)粒有兩個(gè)切點(diǎn)，可以避免質(zhì)粒自身的連接，但是由于NheⅠ的切點(diǎn)在AluⅠ切點(diǎn)的左側(cè)，因此用兩種限制酶切割目的基因時(shí)，與只用AluⅠ切割效果相同，故C不是最佳方法；D選項(xiàng)中質(zhì)粒含有兩種限制酶切點(diǎn)SmaⅠ和NheⅠ，同時(shí)用來(lái)切割質(zhì)粒可以避免質(zhì)粒的自身連接，切割目的基因時(shí)，兩端有這兩種酶的切點(diǎn)，能保證目的基因插入質(zhì)粒中后才能連接，故D是最佳質(zhì)粒。