Question

【題目】熒光定量PCR技術可定量檢測樣本中某種DNA含量。其原理是：在PCR反應體系中每加入一對引物的同時加入一個與某條模板鏈互補的熒光探針，當Taq酶催化子鏈延伸至探針處，會水解探針，使熒光監測系統接受到熒光信號，即每擴增一次，就有一個熒光分子生成。相關敘述錯誤的是（ ）

A.引物與探針均具特異性，與模板結合時遵循堿基互補配對原則

B.Taq酶可以催化子鏈沿著5'→3'方向延伸，需dNTP作為原料

C.反應最終的熒光強度與起始狀態模板DNA含量呈正相關

D.若用cDNA作模板，上述技術也可檢測某基因的轉錄水平

Answer 1

【答案】D

【解析】

PCR技術：

（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

（2）原理：DNA復制。

（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）

（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

A、引物與探針均具特異性，與模板結合時遵循堿基互補配對原則，A正確；

B、根據圖示中引物延伸的方向可以確定，Taq酶只能從引物的3’端延伸子鏈，催化子鏈沿著5’→3’方向延伸，需dNTP作為原料，B正確；

C、題干中提出“加入一個與某條模板鏈互補的熒光探針”，并且“每擴增一次，就有一個熒光分子生成”，因此反應最終的熒光強度與起始狀態模板DNA含量呈正相關，C正確；

D、若用cDNA作模板，需要檢測出總mRNA數目和某基因的mRNA數目，才能計算某基因的轉錄水平，D錯誤。

故選D。